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省人民醫院院檢驗中心開展核酸反向斑點雜交技術

作者:超級管理員 2014-08-23 12:30:01 來源:瀏覽量4863

    反向斑點雜交是利用生物素等標記的探針與特異性擴增PCR產物(靶DNA序列)雜交的新型技術。此項技術一次雜交就可以判斷某一基因座位的大部分或全部等位基因,廣泛用于基因分型、病原體檢測、腫瘤研究等。為滿足臨床和患者需要,我院檢驗中心全自動核酸分子雜交儀將于2014年8月正式投入使用,現將開展項目介紹如下:

開展丙型肝炎病毒(HCV)基因分型,應用反向斑點雜交技術檢測中國常見的1b、2a、3a、3b和6a五種亞型。不同的HCV亞型與病程發展和治療應答相關,根據分型判定治療的難易,制定對應的抗病毒治療個體化方案。不同亞型感染引起臨床過程與干擾素,利巴韋林的治療反應與治療用量不同。

(1)HCV基因分布存在著地理、人群差異,因此當HCV在人群中爆發時,基因分型可作為追查其根源的有效工具。HCV 主要傳播途徑是直接與患者血液接觸,通過對不同人群HCV分子學研究,使包括垂直傳播與性傳播在內的HCV其他傳播途徑受到廣泛關注,并證實HCV可在結腸鏡檢查時于患者一患者問傳播。

(3)感染了HCV 后,絕大多數(80%)患者不能自行清除,而發展為慢性肝炎。研究基因分型在急性感染轉變成慢性HCV中的作用,發現92%1b型急性感染患者會進展為慢性化,而其他類型僅35%~50%。而這一現象已成為研究的焦點。

(5)對干擾素治療的應答: 自從發現HCV以來,對預測干擾素長期應答相關因素的發現是一重大貢獻。多項臨床研究表明,對α-干擾素抗病毒治療應答性有影響的常見因素包括年齡、病程、肝硬化、基因型和HCV RNA血清水平。多元分析表明lb型、高水平的HCV RNA是唯一對α-干擾素治療無應答的獨立性預測因子。普通干擾素治療24周,2型的患者對于擾素的完全應答占60%-70%,而1型患者僅占10%-15%。

適用于丙型肝炎病毒感染患者的各臨床科室。

    真空干燥采血管(生化管),采集患者靜脈血3-4ml(HCV-RNA熒光定量檢測結果>1x103),2h內送檢;48h內4-8℃保存。

     丙型肝炎病毒(HCV)基因分型。

開展人乳頭瘤病毒(HPV)基因分型,定性并分型檢測宮頸脫落細胞樣本和生殖泌尿道分泌物中人乳頭瘤病毒(HPV)常見的28個基因型別,包括:15 種高危型別:16,18,31,33,35,39,45,51,52,56,58,59,68,73,82(MM4);3 種疑似高危型別:26,53,66;10 種低危型別:6,11,40,42,43,44,54,61,81(cp8304),83(MM7)。

人乳頭瘤病毒系空泡病毒A屬,是球形DNA病毒,能引起人體皮膚黏膜的鱗狀上皮增殖。表現為尋常、生殖器疣(尖銳濕疣)等癥狀。 隨著性病中尖銳濕疣的發病率急速上升和宮頸癌、肛門癌等的增多,人乳頭瘤病毒感染越來越引起人們的關注。目前已分離出130多種亞型,其中40多種與宮頸癌發病相關。因此,有針對性地進行HPV 的分型檢測,對于HPV的臨床診斷和宮頸癌的早期預防有重要的意義,可廣泛用于臨床診斷和女性體檢。   

 適用于人乳頭瘤病毒感染患者的各臨床科室。

(1)適用標本類型:宮頸脫落細胞樣本和生殖泌尿道分泌物。

(3)標本采集:

女性尿道樣本:首先使用無菌生理鹽水棉球洗凈尿道口,再用棉拭子插入尿道約2CM,然后捻動拭子,最后將拭子放入細胞保存液中,密閉送檢。采集尿道樣本時,受檢者必須在采集前2 個小時禁止小便。

標本應立即用于測試,4℃保存不應超過1 個星期, -20℃保存不應超過3 個月。

     人乳頭瘤病毒基因分型。

1. 檢測地點:門診七樓檢驗中心分子生物實驗室。

2. 聯系電話:0931-8281223。


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